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    目录号
    尺寸
    BIO-65050
    10 000 Units

    说明

    Tetro™ Reverse Transcriptase 是一种高度灵敏的高稳定性 MMLV 逆转录酶。Tetro Reverse Transcriptase 针对使用各种总 RNA 量的逆转录反应进行了优化,从而使较长的和低丰度的 cDNA 可在 cDNA 合成后通过扩增被检测到。

    Tetro Reverse Transcriptase 适用于第一链 cDNA 的合成、cDNA 文库构建以及用于基因表达 RT-PCR 分析的模板的合成。

    产品特色

    • 高灵敏度 - 适用于从低至 10 pg 的总 RNA 扩增高质量的全长 cDNA
    • 超稳定 - 适用于长基因和稀有转录本
    • 高产量 - 合成适合 PCR 的高质量 cDNA
    • 宽动态范围 - 10 pg 至 2 μg 的 RNA

    产品说明

    Tetro™ Reverse Transcriptase 是莫洛尼鼠白血病病毒 (MMLV) 逆转录酶,具有高稳定性,在室温下放置 1 周后不会丧失活性。Tetro Reverse Transcriptase 即使在模板量有限时也具有高灵敏度(图 1),可从最低 10 pg 至最高 2 μg 的 RNA 实现高效和高度灵敏的转录(图 2)。

    许多 RNA 转录物在较低温度下形成稳定的二级结构,使得它们在这些温度下不适合作为 RT-PCR 的模板。

    Tetro Reverse Transcriptase 适用于总 RNA、mRNA 和 体外转录 RNA 的 cDNA 第一链合成,在使用基因特异性引物、Oligo (dT)随机六聚体引物时具有卓越的性能,是 cDNA 文库构建和合成用于基因表达RT-PCR 分析模板的理想之选。

    Main

    资源

    分析证明书 (COA)

    技术参数

    组件

    试剂

    10,000 单位

    40,000 单位

    Tetro Reverse Transcriptase

    50 µL

    4 x 50 µL

    5x Reaction Buffer

    1.2 mL

    4 x 1.2 mL

    浓度


    200 u/μL

    储存和稳定性

    所有组件均应在收到后储存在 -20°C 下。在推荐条件下储存并正确处理时,试剂盒的全部活性将保持至外盒标签上的有效期。

    运输条件

    以干冰/蓝冰运输



    常见问题解答

    对于 SensiFAST cDNA Synthesis Kit:TransAmp 缓冲液已含有逆转录酶增强子,可减少复杂的 RNA 二级结构。对于具有高度结构的模板,如病毒 RNA 和一些植物 RNA,我们建议执行手册中提到的 48°C 下孵育 15 分钟的额外步骤。对于 Tetro cDNA Synthesis Kit:对于具有高水平二级结构的样品,我们建议在反应设置之前用引物使 RNA 模板变性。此外,还需要优化孵育时间和温度。RT 步骤的温度可以升至最高 48°C。

    PCR 或 qPCR 反应需要的 cDNA 模板量从 pg 到几百 ng 不等。这取决于分析的靶标、使用的应用和样品特征等。如果您的检测没有经验值,请使用 PCR 或 qPCR 检测手册中推荐的量,并根据需要进行优化。

    SensiFAST cDNA Synthesis Kit 不能。随机六聚体和寡 dT 引物已包含在经过优化的 TransAmp 缓冲液中。可以使用 Tetro cDNA Synthesis Kit 的基因特异性引物为特定的靶标产生 cDNA。

    我们推荐使用 EPIK miRNA 检测,从 miRNA 生成 cDNA 并对其进行分析。EPIK 检测的一个优点是有用于 cDNA 合成和检测的 3 种 miRNA 特异性引物。这些引物提高了特异性,增强了对密切相关靶标的识别力。

    SensiFAST cDNA Synthesis Kit 旨在快速生成且无偏倚覆盖 cDNA,尤其适用于随后的实时定量 PCR。优化的 5 倍 TransAmp 缓冲液包括 cDNA 合成所需的所有组分,包括寡 dT 和随机六聚体引物以及 RiboSafe RNase 抑制剂的独特混合物。Tetro cDNA Synthesis Kit 是更灵活的解决方案。您可以选择所需的设置,尤其是所需的 RT 引物。Tetro 试剂盒经过优化,可在各种 RNA 浓度下工作,并获得全长 cDNA,也可用于两步法 PCR 检测。Tetro 是推荐用于生成 cDNA 文库和克隆的试剂盒。