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    目录号
    尺寸
    BIO-25043
    200 x 50µl Reactions
    BIO-25044
    1000 x 50µl Reactions

    说明

    方便的预混液,包含新一代聚合酶,当从任何模板扩增靶标时,提供更高的产量、灵敏度、速度和稳健性。

    产品特色

    • 灵敏 – 包含对 DNA 具有更强亲和力的 MyTaq DNA 聚合酶,即使在模板量有限的情况下也能改善扩增
    • 高效 – 新型缓冲液体系可最大程度提高 PCR 扩增的效率,从而提高任何 PCR 产物的产量
    • 稳健 – 在存在抑制剂的情况下也能可靠地扩增,即使最具挑战性的 DNA 靶标也是如此
    • 灵活 – 适用于从人类、动物和植物样品提取的 DNA 扩增至多 5 kb 的任何靶标
    • 方便 – Master Mix 便于 PCR 设置,包含红色染色剂来提高移液方便性 / 准确度,并支持直接凝胶加样
    • 快速 – 可在快速热循环条件下对更广泛的靶标进行灵敏、可重现和稳健的扩增

    产品说明

    MyTaq™ Red Mix 适用于所有标准 PCR 应用。MyTaq Red Mix 由 MyTaq DNA 聚合酶和一种新型缓冲液体系组成,可针对各种 PCR 模板进行高产量的 PCR 扩增。MyTaq 对 DNA 的亲和力增加,可进行可靠的扩增,即使模板量极低也是如此。MyTaq DNA Polymerase 提供比其他常用聚合酶更稳健的扩增,对于挑战性模板以及在有 PCR 抑制剂的情况下也能良好地发挥作用。此外,MyTaq 的高效性意味着它可以在快速 PCR 条件下提供出色的结果。

    该产品以预混液的形式提供,只需添加模板、引物和水即可,从而减少了 PCR 设置过程中的移液步骤数,可实现快速、高通量和高重现性检测。MyTaq Red Mix 包含红色染料,可增加试剂和反应容器之间的视觉对比度,以提高方便性和移液准确度。红色染料还支持在 PCR 后直接对样品进行凝胶上样,而无需加入上样缓冲液。此外,MyTaq Red 反应缓冲液还包含最佳浓度的 dNTP、MgCl2 和增强剂,有助于消除优化需求,从而节省了进行不必要的重复检测的时间、精力和成本。

    应用

    • 标准 PCR
    • 高产量 PCR
    • 快速 PCR
    • 菌落 PCR
    • TA 克隆
    Main
    在各种 PCR 条件下进行高效和稳健的扩增。

    MyTaq DNA Polymerases 客户评价

    PCR 酶指南

    下载 PCR 酶指南,本指南提供详细的产品说明和性能数据,帮助您选择最适合您研究的产品

    PCR 选择图

    根据您的仪器和样本要求选择最适合于您研究的试剂

    应用指南

    MyTaq™ Red Mix

    近两年来,我们一直在使用 MyTaq Red Mix 进行小鼠基因分型、克隆/扩增子验证以及 RT-qPCR 标准曲线的绘制。该产品包含凝胶上样缓冲液,使用非常方便,每个反应使用低至 5μl 的混合液(10μl 最终体积)就能提供与竞争产品同样的性能。具有竞争力的价格使其成为常规 PCR 非常有吸引力的选择。

    澳大利亚克莱顿哈德逊医疗研究所的 Jonathan Ferrand

    产品选择

    请参阅实时 PCR 选择图 PCR 选择图以确认为您的 PCR 应用推荐的产品。


    资源

    分析证明书 (COA)

    技术参数

    组件

    试剂

    200 次反应

    1000 次反应

    MyTaq Mix, 2x

    4 x 1.25 mL

    20 x 1.25 mL

    浓度

    2x

    储存和稳定性

    所有组件均以干冰/蓝冰运输,应在收到后储存在 -20°C 下以保持最佳稳定性。应避免重复冻/融循环。在推荐条件下储存并正确处理时,试剂的全部活性将保持至外盒标签上的有效期。

    虽然建议将组件在 -20°C 下储存,但也可根据需要在 +4°C 下储存。在 +4°C 下储存时,试剂将自收到之日起保持稳定 2 周。



    常见问题解答

    如果可能的话,我们建议对受影响的样品进行额外的纯化,例如,客户对用 SureClean Plus 纯化含有腐殖酸的样品有非常丰富的经验。或者降低模板浓度,最大程度减少抑制剂的量,可增加聚合酶和引物的量,但不应超过建议的限值。

    Bioline 自豪地向您提供高质量的聚合酶以满足您的要求。为了帮助选择最适合您特定应用的酶,请参阅我们的酶选择工具

    我们所有的聚合酶保证自购买之日起 12 个月内保持稳定。在这段时间内,酶应保存在 -20°C 下,以保持最佳的活性。

    请注意:我们不建议在 -80°C 下储存聚合酶,因为活性位点上可能形成冰晶,从而影响或破坏酶的活性。

    PCR 是一项具有挑战性的技术,需要对各种参数进行优化以获得最佳结果。如果遇到问题,通过处理一些问题即可轻松解决。请参阅 PCR 故障排除指南,以获取建议并获得具体问题的帮助。

    观察 推荐的解决方案
    无或低 PCR 产量  酶浓度太低 – 以 0.5 U 的增量增加酶的量。
     引物降解 – 检查引物的质量和期限。
     镁浓度太低 – 以 0.25 mM 的增量从起始浓度 1.75 mM 开始增加浓度。
     引物浓度未优化。调整引物浓度 (0.3-1 µM);确保两种引物具有相同的浓度。
     模板浓度太低 – 增加模板的浓度。
     进行阳性对照以确保酶、dNTP 和缓冲液不被降解和/或污染。
    多个条带  引物退火温度太低。提高退火温度。引物退火温度应该比计算的引物 Tm 至少低 5°C。
     在冰上制备预混液或使用热活化聚合酶。
     对于特异性低的问题。尝试加入 3% 的 DMSO(未提供)以提高特异性。
    污点或伪影  模板浓度太高。制备连续稀释模板。
     循环次数太多。将循环减少 3-5 次,以去除非特异性条带。
     酶浓度太高 - 以 0.5 U 的增量减少酶的量。
     延伸时间太长。以 0.5-1 分钟的增量缩短延伸时间。


    这些术语是指在进行 PCR 时要考虑的参数,是根据您的需要选择正确的酶的重要特征。因此理解其含义至关重要:产量:PCR 反应中产生的 DNA 量。保真度:将正确的 dNTP 并入延伸的 DNA 链中的酶的准确性。持续合成能力:聚合酶与模板相关的时间长度,以及因此可以扩增的片段大小。特异性:衡量反应中产生的不需要的副产物的度量。

    室温下的 PCR 设置过程中,标准聚合酶会有一些活性。使用热启动聚合酶时,该酶在室温下无活性,因此降低了由于这些误引发的寡核苷酸而引起的反应中非特异性产物的风险。此特点使得这类聚合酶非常适用于反应会在室温下长时间放置的高通量应用。

    在 72°C 条件下,30 分钟内催化 10 nmol dNTP 转变成酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

    所有的 Bioline 聚合酶都有方便的 2 倍预混液形式可供使用,其中含有进行成功 PCR 所需的所有试剂和添加剂,但模板、引物和水除外。该配方不仅提供了方便和无障碍的 PCR 设置,而且还通过减少所需的移液步骤显著减少了人为错误、不准确性和污染的可能性。

    我们推荐的最终反应体积为 50 μL,需要使用 25 μL 的 2 倍预混液,并使用模板、引物和 PCR 级别的水补足 50 μL。

    虽然混合物的确切组成是专有信息,不过所有混合物均由反应缓冲液、镁、dNTP、聚合酶和添加剂组成,旨在保持聚合酶在混合物中稳定,并为 PCR 提供最佳条件。

    MyTaq HS DNA 聚合酶可以很好地处理富含 GC 或重亚硫酸盐转化的 DNA 等困难样品。热启动尤其重要,因为它减少了引物二聚体和非特异性扩增。我们建议按照推荐的方案开始。如果需要优化,我们建议优化退火温度。由于亚硫酸盐转化后的 DNA 降解,增加模板和聚合酶的量可能有用。

    所有 Bioline PCR 混合物均以 2 倍浓度提供,只需要用户添加模板、引物和 PCR 级别的水,直至达到 1 倍最终浓度。

    如果可能的话,我们建议对受影响的样品进行额外的纯化,例如,客户对用 SureClean Plus 纯化含有腐殖酸的样品有非常丰富的经验。或者,降低模板浓度将有助于最大程度减少抑制剂。可增加引物量,但不要超过建议的限值。

    不需要,Red 反应缓冲液和混合物的染料和组成使得样品很容易沉入孔中,可以清楚看到样品,因此将样品加样到琼脂糖凝胶上时不需要加样缓冲液。

    Red 混合物或 Red 反应缓冲液中的染料不会干扰 PCR 产物分离过程或随后的应用(如测序)。使用光度测定法或荧光测定法定量分析有色缓冲液中的 PCR 产物时除外。我们不能排除染料对定量结果的影响,建议对这些样品进行纯化,例如使用 ISOLATE II PCR & Gel Kit 或 SureClean Plus 进行纯化。

    评价

    "自从去年我了解到 MyTaq Red Mix 以来,我一直在使用该产品。不仅 PCR 质量通过 TaqMix 的优异表现得到了极大的提高,而且通过预先加入凝胶上 ..."

    "近两年来,我们一直在使用 MyTaq Red Mix 进行小鼠基因分型、克隆/扩增子验证以及 RT-qPCR 标准曲线的绘制。该产品包含凝胶上样缓冲液,使用非常 ..."

    "“MyTaq Red Mix 非常不错。”" ..."

    "“使用 MyTaq Red Mix 得到的结果非常清晰,比我用 DreamTaq 得到的结果要清楚得多。” ..."

    "“MyTaq Red Mix 在相同的条件下产生了更明亮的条带。” ..."

    "“我对该产品爱不释手 - 我们将用它替代 GoTaq。” ..."

    "“MyTaq Red Mix 易于使用,并产生更明亮的条带。” ..."

    "“MyTaq Red Mix 是完美的产品,为我提供了很好的 PCR 结果和出色的图像,我们很喜欢。” ..."

    "“我们发现 MyTaq 易于使用、价格合理,在各种条件下均表现良好。” ..."