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    目录号
    尺寸
    BIO-21079
    20000 Units
    BIO-21083
    1000 Units
    BIO-21082
    2000 Units
    BIO-21078
    5000 Units

    说明

    MangoTaq™ DNA Polymerase 是 Taq DNA Polymerase 的一种配方,可在广泛的 DNA 浓度范围内提供高产量。

    MangoTaq DNA Polymerase 具有 5´-3´ 核酸外切酶活性,并留下一个 ´A´ 突出端,从而使 PCR 产物适合有效整合到 TA 克隆载体中。

    产品特色

    • 直接凝胶上样 - PCR 后无需进一步的处理步骤
    • 便于视觉识别- 减少移液误差
    • 稳健的性能 - 适合各种 PCR 反应
    • 可重现的结果 - 稳定的 QC 确保可靠性

    产品说明

    MangoTaq™ DNA Polymerase 可在广泛的 DNA 浓度范围内提供高产量。MangoTaq DNA Polymerase 留下一个 ´A´ 突出端,从而使 PCR 产物适合有效整合到 TA 克隆载体中。

    聚合酶提供两种不同的反应缓冲液,以提高灵活性。对于高通量应用,MangoTaq 和有色反应缓冲液是理想的选择,因为这种组合使用户能够直接在凝胶上上样以便于识别。

    提供的两种反应缓冲液为:5x Colored Reaction Buffer 和 5x Colorless Reaction Buffer。有色反应缓冲液含有红色和橙色染料,其在电泳过程中分离,并为监测凝胶中 DNA 样品的迁移率提供快速参考点。可以将有色反应缓冲液直接上样到琼脂糖凝胶上进行分析,而不需要单独的凝胶上样缓冲液。染料的存在对常规的酶促操作没有影响,但可能有极少见的例外情况存在。

    由于无色反应缓冲液不含有参比染料,因此适用于当反应产物直接用于涉及吸光度或荧光检测的下游流程的情况。MangoTaq DNA Polymerase 的特异性和性能可通过与 3% DMSO 的结合使用得到进一步改善,此结合设计用于富含 GC 或 AT 的 DNA、“脏”模板或具有高水平二级结构的序列。

    应用

    • 高通量应用
    • 适合各种 PCR 检测
    • 产物适用于 TA 克隆
    Main

    PCR 选择图

    根据您的仪器和样本要求选择最适合于您研究的试剂

    PCR 酶指南

    下载 PCR 酶指南,本指南提供详细的产品说明和性能数据,帮助您选择最适合您研究的产品

    应用指南

    MangoTaq™ DNA Polymerase

    资源

    分析证明书 (COA)

    技术参数

    组件

    试剂

    1000 单位

    2000 单位

    5000 单位

    MangoTaq

    200 μL

    2 x 200μL

    5 x 200 μL

    5x MangoTaq Colored Reaction Buffer

    4 x 1.5 mL

    8 x 1.5 mL

    20 x 1.5 mL

    5x MangoTaq Colorless Reaction Buffer

    4 x 1.5 mL

    8 x 1.5 mL

    20 x 1.5 mL

    50 mM MgCl2 Solution

    2 x 1.2 mL

    4 x 1.2 mL

    10 x 1.2 mL

    浓度

    5 u/µL

    储存和稳定性

    所有组件应在收到后储存在 -20°C 下以保持最佳稳定性。应避免重复冻/融循环。

    在推荐条件下储存并正确处理时,试剂的全部活性将保持至外盒标签上指定的有效期。

    运输条件

    以干冰或蓝冰运输。

    一个单位在 72°C,30 min 内将掺入 10 nmol dNTP。


    MangoTaq 是 Bioline 的商标。



    常见问题解答

    MangoTaq 的供应浓度为 1 u/µL。

    不需要,MangoTaq 反应缓冲液的染料和组成使得样品很容易沉入孔中,可以清楚看到样品,因此将样品加样到琼脂糖凝胶上时不需要加样缓冲液。

    该缓冲液中的两种有色染料是完全惰性染料,因此对下游应用没有影响。使用光度测定法或荧光测定法定量分析有色缓冲液中的 PCR 产物时除外。我们不能排除这些染料对定量结果的影响,建议对样品进行纯化。如果您担心这些染料会干扰特定应用,我们建议使用 ISOLATE II PCR & Gel Kit 或 SureClean Plus 纯化样品。

    Bioline 自豪地向您提供高质量的聚合酶以满足您的要求。为了帮助选择最适合您特定应用的酶,请参阅我们的酶选择工具

    我们所有的聚合酶保证自购买之日起 12 个月内保持稳定。在这段时间内,酶应保存在 -20°C 下,以保持最佳的活性。

    请注意:我们不建议在 -80°C 下储存聚合酶,因为活性位点上可能形成冰晶,从而影响或破坏酶的活性。

    PCR 是一项具有挑战性的技术,需要对各种参数进行优化以获得最佳结果。如果遇到问题,通过处理一些问题即可轻松解决。请参阅 PCR 故障排除指南,以获取建议并获得具体问题的帮助。

    观察 推荐的解决方案
    无或低 PCR 产量  酶浓度太低 – 以 0.5 U 的增量增加酶的量。
     引物降解 – 检查引物的质量和期限。
     镁浓度太低 – 以 0.25 mM 的增量从起始浓度 1.75 mM 开始增加浓度。
     引物浓度未优化。调整引物浓度 (0.3-1 µM);确保两种引物具有相同的浓度。
     模板浓度太低 – 增加模板的浓度。
     进行阳性对照以确保酶、dNTP 和缓冲液不被降解和/或污染。
    多个条带  引物退火温度太低。提高退火温度。引物退火温度应该比计算的引物 Tm 至少低 5°C。
     在冰上制备预混液或使用热活化聚合酶。
     对于特异性低的问题。尝试加入 3% 的 DMSO(未提供)以提高特异性。
    污点或伪影  模板浓度太高。制备连续稀释模板。
     循环次数太多。将循环减少 3-5 次,以去除非特异性条带。
     酶浓度太高 - 以 0.5 U 的增量减少酶的量。
     延伸时间太长。以 0.5-1 分钟的增量缩短延伸时间。


    这些术语是指在进行 PCR 时要考虑的参数,是根据您的需要选择正确的酶的重要特征。因此理解其含义至关重要:产量:PCR 反应中产生的 DNA 量。保真度:将正确的 dNTP 并入延伸的 DNA 链中的酶的准确性。持续合成能力:聚合酶与模板相关的时间长度,以及因此可以扩增的片段大小。特异性:衡量反应中产生的不需要的副产物的度量。

    在 72°C 条件下,30 分钟内催化 10 nmol dNTP 转变成酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

    所有的 Bioline 聚合酶都有方便的 2 倍预混液形式可供使用,其中含有进行成功 PCR 所需的所有试剂和添加剂,但模板、引物和水除外。该配方不仅提供了方便和无障碍的 PCR 设置,而且还通过减少所需的移液步骤显著减少了人为错误、不准确性和污染的可能性。

    MyTaq HS DNA 聚合酶可以很好地处理富含 GC 或重亚硫酸盐转化的 DNA 等困难样品。热启动尤其重要,因为它减少了引物二聚体和非特异性扩增。我们建议按照推荐的方案开始。如果需要优化,我们建议优化退火温度。由于亚硫酸盐转化后的 DNA 降解,增加模板和聚合酶的量可能有用。

    如果可能的话,我们建议对受影响的样品进行额外的纯化,例如,客户对用 SureClean Plus 纯化含有腐殖酸的样品有非常丰富的经验。或者,降低模板浓度将有助于最大程度减少抑制剂。可增加引物量,但不要超过建议的限值。

    评价

    "“MangoTaq DNA Polymerase 具有最佳的表现,这是唯一能够从已放置 102 年的样品中扩增 620bp 扩增产物的聚合酶。” ..."