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    目录号
    尺寸
    BIO-52068
    10 preps
    BIO-52069
    50 preps
    BIO-52070
    250 preps

    说明

    通过将对富含多酚、多糖植物的 CTAB 裂解,以及对富含多酚或多糖植物的 SDS 裂解的严格性与二氧化硅膜柱纯化的速度和纯度相结合,高效地纯化基因组 DNA。

    产品特色

    • 快速 – 简化的方案可在短至 30 分钟的时间内从 6 种样品中可靠地回收基因组 DNA
    • 高性能 – 提取适用于所有下游应用的高质量 DNA
    • 高效 – 优化的裂解条件和柱基质可改善从广泛的植物样品中回收基因组 DNA
    • 通用 – 精选的两种裂解缓冲液可确保从任何植物材料中出色地回收基因组 DNA
    • 方便 – 试剂盒包括所有必要的组件,包括过滤器(破碎器)和 RNase A
    • 安全 – 无有害的苯酚/氯仿萃取、氯化铯离心、氯化锂或乙醇沉淀

    产品说明

    ISOLATE II Plant DNA Kit 提供了一种简单、高效的柱分离方法,可从各种植物材料中分离基因组 DNA,而无需使用苯酚等有害试剂。

    ISOLATE II Plant DNA Kit 将 CTAB 裂解的严格性以及二氧化硅膜纯化的速度和易用性相结合,提供了一种从大多数植物细胞,特别是富含多糖的植物细胞中纯化高质量基因组 DNA 的快速方法,这些细胞包括叶、皮、根茎和果实,以及粪肥、动物粪便、土壤和堆肥样品。

    有些植物组织在 CTAB 中裂解效果不佳,因此还提供了基于 SDS 的裂解缓冲液供选用。在裂解期间可以使用试剂盒提供的 RNase A 处理以去除残留的 RNA。 

    ISOLATE II Plant DNA Kit 设计用于在 qPCR 中与 SensiFAST Real-Time PCR Kits 结合使用以及在终点 PCR 中与 Bioline PCR 产品系列的任何酶(包括MyTaq DNA Polymerase)结合使用提供最佳性能。

    应用

    • qPCR
    • 终点 PCR
    • Southern 印迹、点印迹和狭线印迹
    • 基因分型
    • 限制性酶切
    • 下一代测序
    • 重亚硫酸盐转化/甲基化分析
    Main
    从各种植物组织(包括叶、皮、根茎和果实)中快速纯化高质量的基因组 DNA。

    ISOLATE II 指南

    下载 ISOLATE II 指南,本指南提供详细的产品说明和性能数据,帮助您选择最适合您研究的产品

    应用指南

    ISOLATE II Plant DNA Kit

    从土壤样品中分离 DNA 是一个巨大的挑战,因为样品充满了抑制剂,如聚合物或低分子物质,这阻碍了下游应用。因此,很难找到能够提供稳定 DNA 的试剂盒。ISOLATE II Plant DNA Kit 能够处理这些样品,并且对土壤样品效果很好。

    德国 Zweibruecken 技术学院的 Katharina Schulte

    资源

    分析证明书 (COA)

    技术参数

    组件

    试剂

    10 次制备

    50 次制备

    250 次制备

    ISOLATE II Filters

    10

    50

     250

    ISOLATE II Plant Columns

    10

    50

     250

    Collection Tubes (2 mL)

    20

    100

    500 

    Lysis Buffer PA1

    5 mL

    25 mL

    125 mL

    Lysis Buffer PA2

    4 mL

    20 mL

    100 mL

    Precipitation Buffer PL3

    1 mL

    5 mL

    25 mL

    Binding Buffer PB

    6 mL

    30 mL

    125 mL

    Wash Buffer PAW1

    6 mL

    30 mL

    125 mL

    Wash Buffer PAW2

    6 mL

    25 mL

    50 mL

    Elution Buffer PG

    5 mL

    15 mL

    30 mL

    RNase A (lyophilized)

    1.5 mg

    6 mg

    2 x 15 mg

    Product Manual

    1

    1

    1

    Bench Protocol Sheet

    1

    1

    1

    储存和稳定性

    所有组件均应在室温下干燥储存。

    在推荐条件下储存并正确处理时,试剂的全部活性将保持至外盒标签上指示的有效期。

    运输条件

    环境温度。



    常见问题解答

    ISOLATE II 试剂盒附带的柱可能看起来很相似,但是每种类型都经过了优化,可以在相应试剂盒提供的缓冲液系统内使用。在试剂盒之间交换柱(或缓冲液)可能导致无论如何都无法回收核酸,或至少严重损害纯化。

    如果仅进行了样品裂解,DNA/RNA 提取过程是可以中断的。可以将样品混匀并裂解,用于 RNA 提取之前将其保存在冰箱中。用柱进行纯化 RNA 不能中断,我们建议在柱纯化过程中避免延迟。如果无法避免延迟,则应该将这些柱存放在冰上。

    洗脱缓冲液适用于限制性内切酶消化、测序和 PCR 等应用。可以使用不含 DNase 的水进行洗脱,但是产量略低。

    该试剂盒的洗脱缓冲液不含可能干扰 PCR 或测序等下游应用的 EDTA。

    如果储存在 20°C 下,裂解缓冲液 PA1 和 PA2 都可能变混浊。它们含有可沉淀的 CTAB (PA1) 和 SDS (PA2)。在 37°C 下孵育几分钟后可再次变清。



    对于不同的样品来说,最好的裂解缓冲液是无法确定的,请并行尝试裂解缓冲液 (SDS/CTAB) 以确定植物样品的最佳缓冲液。

    ISOLATE II Genomic DNA Kit 提供的方案可用于裂解困难细菌(参见章节 9.2)。ISOLATE II Plant DNA kit 也适合,因为该试剂盒的优化的裂解缓冲液也可以处理这些裂解困难细菌。一般来说,需要使用推荐用于此类样品的合适的机械、酶或化学方法来优化裂解步骤。请参考相关文献或向 Bioline 技术支持寻求进一步的建议。

    可使用 ISOLATE II Plant DNA and RNA 试剂盒。这些试剂盒的裂解经过优化,可能对于裂解困难细菌和土壤样品中真菌的处理也有用

    要使回收大 RNA/DNA 片段效果最佳,有必要优化洗脱步骤。使用更大的体积进行洗脱,在离心之前用洗脱缓冲液孵育柱并重复洗脱步骤对提高回收率有帮助。为避免过度稀释,再次重新使用洗脱分数可能会有所帮助。此外,将洗脱缓冲液加热至 70°C 可能对 DNA 洗脱有益。



    评价

    "“从土壤样品中分离 DNA 是一个巨大的挑战,因为样品充满了抑制剂,如聚合物或低分子物质,这阻碍了下游应用。因此,很难找到能够提供稳定 DNA 的试剂盒。ISO ..."

    "“与真菌打交道意味着在使用 DNA 分离试剂盒时要接受妥协,因为在大多数情况下没有专门的真菌应用试剂盒。ISOLATE II Plant DNA Kit 对于链 ..."