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    目录号
    尺寸
    BIO-52058
    10 Preps
    BIO-52059
    50 preps
    BIO-52060
    250 preps

    说明

    简便地从琼脂糖凝胶中纯化 DNA 片段(包括 PCR 产物),具有硅胶膜纯化的速度和纯度。

    产品特色

    • 快速 – 方案简化,可仅在 10 分钟内从多达 6 个凝胶片中回收 DNA
    • 高效 – 柱基质回收率在 70% 到 95% 之间
    • 高性能 – 回收稳定高质量 DNA,非常适合所有下游应用
    • 多功能 – 单缓冲液可促进从 TAE 和 TBE 琼脂糖凝胶中有效回收 DNA
    • 安全 – 无有害的苯酚/氯仿萃取、氯化铯离心、氯化锂或乙醇沉淀

    产品说明

    ISOLATE II PCR and Gel Kit 提供一种简单、高效的膜基方法,可从 PCR 反应以及 TAE 和 TBE 琼脂糖凝胶中纯化 DNA,而不需要有害试剂或乙醇进行沉淀。

    使用简单的结合和洗脱步骤,可以在 10 分钟内纯化 6 种 PCR 产物。可以洗脱 60 bp - 15 kb 之间的浓缩 PCR 产物,除去引物、核苷酸、酶、矿物油、盐类等杂质。

    在约 20 分钟内,使用显色指示剂可从 6 个琼脂糖凝胶片中提取 50 bp - 20 kb 之间的 DNA 片段,以保持最佳 pH 值并鉴定未溶解的琼脂糖。

    ISOLATE II PCR and Gel Kit 旨在为转化、克隆、测序和限制性分析提供最佳性能。

    应用

    • 克隆
    • 连接
    • 限制性酶切
    • 荧光测序
    • 标记
    • PCR
    • 转染
    • 体外转录
    Main
    从 PCR 反应和琼脂糖凝胶中快速纯化 DNA。

    ISOLATE II 指南

    下载 ISOLATE II 指南,本指南提供详细的产品说明和性能数据,帮助您选择最适合您研究的产品

    资源

    分析证明书 (COA)

    技术参数

    组件

    试剂

    10 次制备

    50 次制备

    250 次制备

    ISOLATE II PCR and Gel Columns(黄色)

    10

    50

    250

    Collection Tubes

    10

    50

    250

    Binding Buffer CB

    10 mL

    40 mL

    200 mL

    Wash Buffer CW (Concentrate)

    6 mL

    25 mL

    2 x 50 mL

    Elution Buffer C

    13 mL

    13 mL

    30 mL

    Bench Protocol Sheet

    1

    1

    1

    储存和稳定性

    所有组件均应在室温下干燥储存。

    在推荐条件下储存并正确处理时,试剂的全部活性将保持至外盒标签上指示的有效期。

    运输条件

    在环境温度下运输。



    常见问题解答

    ISOLATE II 试剂盒附带的柱可能看起来很相似,但是每种类型都经过了优化,可以在相应试剂盒提供的缓冲液系统内使用。在试剂盒之间交换柱(或缓冲液)可能导致无论如何都无法回收核酸,或至少严重损害纯化。

    如果仅进行了样品裂解,DNA/RNA 提取过程是可以中断的。可以将样品混匀并裂解,用于 RNA 提取之前将其保存在冰箱中。用柱进行纯化 RNA 不能中断,我们建议在柱纯化过程中避免延迟。如果无法避免延迟,则应该将这些柱存放在冰上。

    洗脱缓冲液适用于限制性内切酶消化、测序和 PCR 等应用。可以使用不含 DNase 的水进行洗脱,但是产量略低。

    该试剂盒的洗脱缓冲液不含可能干扰 PCR 或测序等下游应用的 EDTA。

    可以,但需要一定的优化。将洗脱缓冲液加温至 50°C 甚至 70°C,然后将其应用于纯化柱,这样有助于洗脱长 PCR 产物,但经过该方案调整,引物也有可能被洗脱。



    ISOLATE II PCR and Gel Kit 在标准条件下使用,可以将大部分 PCR 引物从其产物中分离出来。仅为 30 bp 的引物被有效分离,但是大约 100 bp 的较长诱变引物可连同扩增子一起从 PCR 缓冲液中分离。

    ISOLATE II Plasmid Mini Kit 可用于纯化和浓缩裸质粒 DNA。可以将 DNA 直接加样到新鲜柱上,然后按照标准方案执行剩余的清洗、干燥和洗脱步骤。可以通过减少最后阶段的洗脱体积来浓缩样品。但是通过使用 ISOLATE II PCR and Gel Kit 以及将质粒样品当作 PCR 产物进行处理可以获得更好的回收率。

    要使回收大 RNA/DNA 片段效果最佳,有必要优化洗脱步骤。使用更大的体积进行洗脱,在离心之前用洗脱缓冲液孵育柱并重复洗脱步骤对提高回收率有帮助。为避免过度稀释,再次重新使用洗脱分数可能会有所帮助。此外,将洗脱缓冲液加热至 70°C 可能对 DNA 洗脱有益。