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    尺寸
    BIO-25012
    500 x 50µl Reactions

    说明

    BioMix™ 是一种完整的即用型 2x 反应混合物,含有超稳定的 Taq DNA 聚合酶。BioMix 允许您通过简单地加入水、模板和引物来执行许多常见基因组和 cDNA 模板的 PCR 检测。

    产品特色

    • 形式方便 - 预先混合、预先优化的 2x 溶液
    • 用途广泛 - 适用于各种常规 PCR 应用
    • 直接使用 - 降低污染风险
    • 适合 TA 克隆 - 留下“A”突出端

    产品说明

    BioMix™ 是一种完整的即用型 2x 反应混合物,含有稳定的 Taq DNA 聚合酶。用于执行许多常见基因组和 cDNA 模板的 PCR 检测,只需加入水、模板和引物。

    BioMix 减少了设置反应所需的时间,从而将污染风险降至最低。通过减少可能导致误差的移液步骤来确保更高的重现性。

    BioMix 配有额外的 MgCl2溶液,可根据需要对反应体系进行微调。

    应用

    • 常规 PCR 应用
    • 产物适用于 TA 克隆
    Main

    PCR 酶指南

    下载 PCR 酶指南,本指南提供详细的产品说明和性能数据,帮助您选择最适合您研究的产品

    MyTaq™ Mix

    在各种 PCR 条件下进行高效和稳健的扩增。

    PCR 选择图

    根据您的仪器和样本要求选择最适合于您研究的试剂

    HyperLadder™ 1kb

    即用型分子量标志物可轻松确定 DNA 的方向和大小(10 kb)。

    资源

    分析证明书 (COA)

    技术参数

    组件

    试剂

    500 次反应

    BioMix™

    10 x 1.25 mL

    50 mM MgCl2 Solution

    1.2 mL

    体积

    • BIO-25012: 500 x 50 µL 次反应:2 x 1.25 mL

    浓度

    2x

    储存和稳定性

    所有组件均以干冰/蓝冰运输,应在收到后储存在 -20°C 下以保持最佳稳定性。应避免重复冻/融循环。在推荐条件下储存并正确处理时,试剂的全部活性将保持至外盒标签上的有效期。

    虽然建议将组件在 -20°C 下储存,但也可根据需要在 +4°C 下储存。在 +4°C 下储存时,试剂将自收到之日起保持稳定最长 2 周。



    常见问题解答

    Bioline 的混合物的氯化镁浓度见下表。随每种混合物提供一管额外的 50 mM MgCl2 溶液,需要时可用于进一步优化。



     Bioline Mix 最终镁浓度
    ACCUZYME Mix  2.0 mM.
    BioMix/BioMix Red  2.5 mM.
    ImmoMix/ImmoMix Red  3.0 mM.
    BIO-X-ACT Short Mix  2.0 mM.
    MangoMix  2.5 mM.
    MyTaq  3.0 mM.
    RANGER  1.5 mM.



    Bioline 自豪地向您提供高质量的聚合酶以满足您的要求。为了帮助选择最适合您特定应用的酶,请参阅我们的酶选择工具

    我们所有的聚合酶保证自购买之日起 12 个月内保持稳定。在这段时间内,酶应保存在 -20°C 下,以保持最佳的活性。

    请注意:我们不建议在 -80°C 下储存聚合酶,因为活性位点上可能形成冰晶,从而影响或破坏酶的活性。

    PCR 是一项具有挑战性的技术,需要对各种参数进行优化以获得最佳结果。如果遇到问题,通过处理一些问题即可轻松解决。请参阅 PCR 故障排除指南,以获取建议并获得具体问题的帮助。

    观察 推荐的解决方案
    无或低 PCR 产量  酶浓度太低 – 以 0.5 U 的增量增加酶的量。
     引物降解 – 检查引物的质量和期限。
     镁浓度太低 – 以 0.25 mM 的增量从起始浓度 1.75 mM 开始增加浓度。
     引物浓度未优化。调整引物浓度 (0.3-1 µM);确保两种引物具有相同的浓度。
     模板浓度太低 – 增加模板的浓度。
     进行阳性对照以确保酶、dNTP 和缓冲液不被降解和/或污染。
    多个条带  引物退火温度太低。提高退火温度。引物退火温度应该比计算的引物 Tm 至少低 5°C。
     在冰上制备预混液或使用热活化聚合酶。
     对于特异性低的问题。尝试加入 3% 的 DMSO(未提供)以提高特异性。
    污点或伪影  模板浓度太高。制备连续稀释模板。
     循环次数太多。将循环减少 3-5 次,以去除非特异性条带。
     酶浓度太高 - 以 0.5 U 的增量减少酶的量。
     延伸时间太长。以 0.5-1 分钟的增量缩短延伸时间。


    这些术语是指在进行 PCR 时要考虑的参数,是根据您的需要选择正确的酶的重要特征。因此理解其含义至关重要:产量:PCR 反应中产生的 DNA 量。保真度:将正确的 dNTP 并入延伸的 DNA 链中的酶的准确性。持续合成能力:聚合酶与模板相关的时间长度,以及因此可以扩增的片段大小。特异性:衡量反应中产生的不需要的副产物的度量。

    在 72°C 条件下,30 分钟内催化 10 nmol dNTP 转变成酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

    所有的 Bioline 聚合酶都有方便的 2 倍预混液形式可供使用,其中含有进行成功 PCR 所需的所有试剂和添加剂,但模板、引物和水除外。该配方不仅提供了方便和无障碍的 PCR 设置,而且还通过减少所需的移液步骤显著减少了人为错误、不准确性和污染的可能性。

    我们推荐的最终反应体积为 50 μL,需要使用 25 μL 的 2 倍预混液,并使用模板、引物和 PCR 级别的水补足 50 μL。

    虽然混合物的确切组成是专有信息,不过所有混合物均由反应缓冲液、镁、dNTP、聚合酶和添加剂组成,旨在保持聚合酶在混合物中稳定,并为 PCR 提供最佳条件。

    MyTaq HS DNA 聚合酶可以很好地处理富含 GC 或重亚硫酸盐转化的 DNA 等困难样品。热启动尤其重要,因为它减少了引物二聚体和非特异性扩增。我们建议按照推荐的方案开始。如果需要优化,我们建议优化退火温度。由于亚硫酸盐转化后的 DNA 降解,增加模板和聚合酶的量可能有用。

    所有 Bioline PCR 混合物均以 2 倍浓度提供,只需要用户添加模板、引物和 PCR 级别的水,直至达到 1 倍最终浓度。

    如果可能的话,我们建议对受影响的样品进行额外的纯化,例如,客户对用 SureClean Plus 纯化含有腐殖酸的样品有非常丰富的经验。或者,降低模板浓度将有助于最大程度减少抑制剂。可增加引物量,但不要超过建议的限值。